Unter den wachsamen Augen von Moderator Michael Bully Herbig lassen sich auch in der dritten Staffel von „LOL: Last One Laughing“ wieder sowohl „LOL“-Veteran*innen als auch -Neulinge auf den aberwitzigen Nicht-Lachen-Wettbewerb ein, um für einen guten Zweck um einen Geldpreis zu kämpfen. Mit dabei sind unter anderem Christoph Maria Herbst, Michelle Hunziker, Palina Rojinski, Olaf Schubert und Rückkehrerin Anke Engelke, die damit als Einzige in bisher allen „LOL“-Staffeln mitgemischt hat. Außerdem kommt es in Staffel 3 zum letzten Comedy-Auftritt von Komiker Mirco Nontschew, der im Dezember 2021 überraschend im Alter von 52 Jahren verstorben ist.