Für Harley Quinn (Originalstimme: Kaley Cuoco) und Poison Ivy (Originalstimme: Lake Bell) hat sich einiges verändert. Auch wenn der Mordanschlag auf den Joker missglückt ist, tritt Poison Ivy dennoch ihre neue Stelle als Anführerin der League of Doom an. Sich gegen ihre männlichen Mitarbeiter durchzusetzen, wird jedoch alles andere als einfach, weil ihre Autorität ständig in Frage gestellt wird. Kann sie es schaffen, sich gegen kleingeistige Vorurteile durchzusetzen? Harley muss sich währenddessen als neues Mitglied der Bat Family zurechtfinden, doch noch ist fraglich, ob sie das Zeug zur Heldin hat. Kann das wirklich gutgehen, wenn sie dafür alles hinter sich lässt, was sie eigentlich so besonders macht?