Nachdem Harley Quinn (Stimme im Original: Kaley Cuoco) und Poison Ivy (Lake Bell) auf ihrer "Eat, bang, kill"-Tour um die Welt ziehen, werden sie auf den 83. jährlichen "Villy Awards" als bestes Paar nominiert. In der Zwischenzeit befindet sich der Joker (Alan Tudyk) im Wahlkampf um Gothams Bürgermeisteramt, wobei sein Gegenspieler Gordon (Christopher Meloni) unerwartete Unterstützung von Two-Face (Andy Daly) erhält.