Die Mafia um Carmine Falcone (Stimme im Original: Titus Welliver) kontrolliert Gotham City. Der Gangsterboss will sogar Bruce Wayne (Jensen Ackles) für seine Geschäfte einspannen. Als Batman beschließt der Millardär, gemeinsam mit Polizei-Captain Jim Gordon (Billy Burke) und dem idealistischen Staatsanwalt Harvey Dent (Josh Duhamel) die Mafia endgültig zu vertreiben und nutzt auch seinen Einfluss als Bruce Wayne für dieses Ziel. Doch an den Feiertagen treibt ein Killer, den die Presse „Holiday“ tauft, sein Unwesen, der Falcones Männer ins Visier nimmt und auch den Joker (Troy Baker) auf den Plan ruft, der nur einen Verrückten in der Stadt sehen will. Erstmals schlägt der Killer an Halloween zu und tötet Johnny Viti, den Neffen von Falcone. Doch auch an Thanksgiving, Weihnachten und Neujahr sterben Menschen in Gotham...
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