In dem Spin-off von "JAG - Im Auftrag der Ehre" geht das Team um Special Agent Leroy Jethro Gibbs (Mark Harmon) auf Verbrecherjagd. Ermittelt wird bei Fällen, die mit der US-Navy oder dem Marine Korps zusammenhängen. Da Gibbs und seine Untergebenen nicht Teil der militärischen Befehlskette sind, haben sie vielseitige Möglichkeiten bei der Auflösung der Fälle. Oft werden Gesetze und Regeln auch etwas weiter ausgelegt, um sich auf die Spur der Täter zu begeben.
Gibbs ist ein früherer Soldat, der harten Befragungen nicht aus dem Weg geht und bei den Verhören oft auch auf sein Bauchgefühl hört. Ihm unterstellt ist Tony DiNozzo (Michael Weatherly), ein Frauenheld, der zwar oft den Klassenclown markiert, aber auch immer seine Arbeit erledigt. Weiterhin gehören dem Team Ziva David (Cote De Pablo), eine frühere Mossad-Agentin, und der Computer-Nerd Timothy McGee (Sean Murray) an. Unterstützt werden sie von Abby Sciuto (Pauley Perrette), die wie eine Tochter für Gibbs ist, und Dr. Donald "Ducky" Mallard (Pauley Perrette), einem sehr exzentrischen Mediziner.